簡要描述：本產(chǎn)品是可用于凍存以小鼠 ES 細胞為代表的各種通用細胞株的無血清型細胞凍存液。含 BSA 和 10% DMSO 。標準測試中用小鼠 ES 細胞 D3 株凍存、復(fù)蘇，確認其細胞存活率。本產(chǎn)品采用緩慢凍存法凍存細胞，無需使用程序降溫盒。
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 一個月 |
|---|
人iPS 細胞·小鼠 ES 細胞凍存用
StemSure® 細胞凍存液 Update?。?/em>
本產(chǎn)品是可用于凍存以小鼠 ES 細胞為代表的各種通用細胞株的無血清型細胞凍存液。含 BSA 和 10% DMSO 。標準測試中用小鼠 ES 細胞 D3 株凍存、復(fù)蘇，確認其細胞存活率。本產(chǎn)品采用緩慢凍存法凍存細胞，無需使用程序降溫盒。
使用本產(chǎn)品對小鼠 ES 細胞 D3 株在 -80℃ 進行保存，可凍存２年；普通細胞在 -150℃ 下可凍存 30 個月，并且可維持很高的存活率。
另外，本產(chǎn)品已確認可用于凍存人 iPS 細胞。
◆特點
● 可在維持人 iPS 細胞、小鼠 ES 細胞未分化能力的狀態(tài)下，直接進行凍存。
● 可在 -80℃ 下進行長時間凍存。
● 凍存的通用動物細胞株的細胞存活率好。
● 無血清型
● 無需自行配制試劑
● 無需使用程序降溫盒
◆測試項目
● 細胞存活率時間（使用小鼠 ES 細胞 D3 株進行實驗）
● 無菌實驗
● 內(nèi)毒素實驗
● 支原體實驗
◆使用方法
人 iPS 細胞的凍存
1. 凍存
① 去除人 iP S細胞培養(yǎng)皿中的營養(yǎng)液，用 PBS 清洗后，用 Accutase 等剝離細胞。
② 添加含有 10 μmol/L Y-27632的人 iPS 培養(yǎng)基（hPSC 培養(yǎng)基（+ROCKi）），用移液器吹打成單細胞。
③ 將吹打分散的細胞懸浮液移至樣本管，離心（1,000 rpm，3 min，室溫）后去除上清液。
④ 添加含 hPSC 培養(yǎng)基（+ROCKi）的培養(yǎng)基，用移液器懸浮。
⑤ 計算細胞數(shù)量。
⑥ 以１×106 cells/管分注在細胞懸浮液保存管中。
⑦ 離心（1,000 rpm，3 min，室溫）后去除上清液。
⑧ 使用 50 μL/管本產(chǎn)品進行懸浮，在 -80℃ 下進行凍存。
2. 復(fù)蘇
① 在凍存管中添加 hPSC 培養(yǎng)基（+ROCKi），復(fù)蘇凍結(jié)細胞（不使用溫水浴法）。
② 離心（1,000 rpm，3 min，室溫）后去除上清，再次添加 hPSC 培養(yǎng)基（+ROCKi），懸浮。
③ 計算細胞數(shù)量。
④ 在培養(yǎng)皿中按照２×105 cells/6 cm 進行細胞培養(yǎng)。
小鼠ES細胞、通用動物細胞株的凍存
1. 凍存
① 收集細胞至樣本管中。
② 離心，去除上清。
③ 在樣本管中加入本產(chǎn)品，懸浮。
④ 分注至懸浮液保存管中。
⑤ 將保存管在-80℃凍潔一晚。
⑥ 保存于-150℃或-80℃
2. 復(fù)蘇
① 將凍存管置于37℃的水浴槽中解凍。
② 在培養(yǎng)用的培養(yǎng)基中進行懸浮。
③ 離心去除上清后用培養(yǎng)基進行重懸。
④ 在培養(yǎng)容器內(nèi)培養(yǎng)細胞。
◆人iPS 細胞 201B7 細胞系的凍存 Update！！
將人 iPS 細胞 201B7 株分散為單細胞后，在 StemSure® 凍存液中懸浮，并在-80℃下凍存４天。反復(fù)凍結(jié)、復(fù)蘇３次之后，確認細胞存活率和各種未分化標記（Oct3/4、Sox2、SSEA-4、Tra-1-81）的表達。
細胞生存率
未分化標記表達的確認
◆小鼠 ES 細胞 D3 細胞系的凍存
-150℃保存（30個月）
-80℃保存（24個月）
<凍存>
① 在 1 mL本產(chǎn)品中懸?。眫2×106 cells，分注至凍存管中。
② 在 -80℃凍存１天后轉(zhuǎn)移至-150℃凍存?；蛘咴?80℃凍存。
<復(fù)蘇>
③ 在37℃的溫浴槽中復(fù)蘇。
④ 在細胞培養(yǎng)基中懸浮、離心。
⑤ 棄上清，用細胞培養(yǎng)基重懸細胞并進行培養(yǎng)。
○確認細胞集落形成
培養(yǎng)細胞數(shù)：500個細胞/孔（含膠原蛋白涂層的６孔板）
培養(yǎng)時間：10天
◆凍存通用動物細胞系后的細胞存活率
用 StemSure® 細胞凍存液凍存各種動物細胞株?？纱_認到凍存30個月后仍維持高存活率，且復(fù)蘇后細胞可移植。
細胞種類 | 存活率（%） | 細胞移植 | ||
2個月 | 4個月 | 30個月 | ||
人 | ||||
HeLa | 97 | 93 | 97 | ○ |
293T | 96 | 95 | 95 | ○ |
K562 | 91 | 84 | 84 | ○ |
靈長類 | ||||
COS-7 | 97 | 93 | 92 | ○ |
Vero | 95 | 94 | 91 | ○ |
狗 | ||||
MDCK | 98 | 99 | 100 | ○ |
小鼠 | ||||
NIH/3T3 | 93 | 93 | 89 | ○ |
P19 | 93 | 76 | 77 | ○ |
STO | 90 | 91 | 91 | ○ |
L929 | 94 | 90 | 91 | ○ |
倉鼠 | ||||
CHO | 97 | 96 | 98 | ○ |
<凍存>
① 在 1 mL本品中懸浮 1~2×106 cells，分注至凍存管中。
② 在-80℃凍存1天后轉(zhuǎn)移至-150℃分別凍存２個月、４個月、30個月。
<復(fù)蘇>
③ 在37℃的水浴槽中復(fù)蘇。
④ 細胞培養(yǎng)用培養(yǎng)基中懸浮、離心。
★其他凍存液★
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 容量 |
031-24051 | CultureSure™ DMSOCultureSure™ 二甲基亞砜 | 細胞培養(yǎng)用 | 10 mL×10 |
039-23511 | CultureSure™ Freezing Medium | 細胞培養(yǎng)用 | 10 mL |
◆相關(guān)產(chǎn)品
★StemSure® 系列★
本系列產(chǎn)品適用于培養(yǎng) ES 細胞和 iPS 細胞。每個批次產(chǎn)品都適用小鼠 ES 細胞 D3 細胞系進行品質(zhì)實驗檢測。
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 容量 |
197-16275 | StemSure® D-MEM (High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate | 細胞培養(yǎng)用 | 500 mL |
191-18375 | Stemsure® Serum Replacement | 細胞培養(yǎng)用 | 500 mL |
198-15781 | StemSure® 10 mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution ( × 100) | 細胞培養(yǎng)用 | 100 mL |
195-15791 | StemSure® 50 mmol/L Monothioglycerol Solution ( × 100) | 細胞培養(yǎng)用 | 100 mL |
190-15805 | StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution | 細胞培養(yǎng)用 | 500 mL |
199-16051 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 細胞培養(yǎng)用 | 106 units |
195-16053 | StemSure® LIF, Mouse,recombinant, Solution | 細胞培養(yǎng)用 | 106 units×10 |
★rBC2LCN-FITC★
rBC2LCN 可特異性識別未分化的人ES/iPS細胞。將本產(chǎn)品添加至含有人ES/iPS細胞的培養(yǎng)液中，可對活性狀態(tài)下的未分化細胞進行染色。<詳情>
★液體培養(yǎng)基·細胞培養(yǎng)用試劑★
FUJIFILM Wako 充分準備了以液體培養(yǎng)基為代表的ping衡鹽溶液、細胞分離·分散用溶液、抗sheng物素溶液、細胞外基質(zhì)等產(chǎn)品。<詳情>
★ES·iPS細胞研究用試劑★
2007年 iPS 細胞樹突發(fā)表后，許多與iPS細胞有關(guān)的文獻被發(fā)表出來。FUJIFILM Wako 推出了在各個文獻中都有所報道的與維持ES細胞·iPS細胞的未分化能和分化誘導(dǎo)相關(guān)的低分子化合物。<PDF下載>
★L(fēng)IF，人，重組體，培養(yǎng)上清★
LIF 具有抑制小鼠 ES 細胞分化的作用，因此可在培養(yǎng)細胞時，用來維持 ES 細胞的未分化狀態(tài)。<詳情>
無動物源成分的干細胞凍存液，請點擊：StemSure® hPSC凍存液, AF
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品等級 | 備注 |
| 195-16031 | StemSure Freezing Medium StemSure細胞凍存液 | 100 mL | - | - |
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